Comparación de la producción de las enzimas exopectinasas de Aspergillus niger obtenidas por fermentación sólida y sumergida Pubblico Deposited
Exopectinases (EPs) production by Aspergillus niger (C28B25) was studied on both solid-state (SSF), which was carried out on polyurethane foam (PUF), and submerged fermentation (SmF). Two different synthetic media (with and without sucrose) and two different water activities (Aw; 0.995 and = 0.96, which were adjusted by using ethylene glycol) on each fermentation were evaluated. In all fermentations the initial conditions of pH and temperature were 4.5 and 35°C respectively. Rate of growth, kinetics of the EPs production, as well as proteases excretion profiles, pH's and substrate consumption were determined. Isoelectrofocusing and zymograms were obtained from extracts with maximal EPs activity. It was concluded that SSF did not show carbon catabolite repression (CCR) in the presence of high levels of sugar. SSF in presence of sucrose showed higher productivities, resulted in higher maximal biomass and lower levels of proteases than SmF. No differences of maximal biomass were observed between SSF and SmF with sucrose and high Aw. However, EPs production was higher in FML. It may be concluded that SSF was more productive of EPs only in presence of high levels of sucrose and high Aw. SSF did not show CCR. At high sucrose levels, biomass production and the productivity of EPs were higher than those obtained in SmF. The high levels of EPs in SSF did not depend on the yield of enzyme per biomass unit, depended on high levels of biomass produced without CCR. The depression of A\%. had a negative effect on growth but not on EPs production. There were no observed diffsrences concerning EPs in the zymograms from any of the extracts tested. The isoslectrofocusing showed variability in the extracts cbtained by both fermentation systems with Aw =0.96.
Se utilizó la cepa de Aspergillus niger C28B25 para producir exopectinasas (EP) por fermentación sólida (FMS) sobre espuma de poliuretano (PUF) y por fermentación sumergida (FML). Se evaluaron dos medios de cultivo (con y sin sacarosa) y dos actividades de agua (Aw = 0.995 y 0.96 ajustada con etilenglicol); el pH y temperatura inicial de todas las fermentaciones fueron de 4.5 y 35 "C respectivamente. Se obtuvieron las curvas de crecimiento, de actividad de EP y de proteasas, del perfil de pH y de azúcares residuales. Se realizaron isoelectroenfoques y zimogramas de los extractos con mayor actividad EP. Se corroboró que la FMS no presenta represión catabólica en la síntesis de EP. Se observó que la sacarosa, incrementa la biomasa máxima y la productividad de las EP en la FMS, así como, disminuye la producción de proteasas en ambos sistemas de fermentación. En ausencia de sacarosa y elevada Aw, no se presentaron diferencias significativas de biomasa entre la FMS y la FML, pero la producción de EP fue favorecida en la FML. Se concluye que la FMS es más productiva de exopectinasas que la FML, solo en presencia de elevados niveles de azúcares, pues la alta productividad de las EP en FMS se debe a una mayor producción de biomasa y no a un mayor rendimiento de enzima por unidad de biomasa. La depresión de la Aw tiene un efecto inhibitorio del crecimiento del hongo, pero no de la síntesis de EP. No se encontraron diferencias zimográficas de las pectinasas, asociadas a la composición del medio de cultivo, a la Aw o al sistema de producción (Le. FMS ó FML). En los isoelectroenfoques se observaron al menos dos picos de actividad EP, el más pequeño con PI = 3.1 y el segundo a PI = 5.7. La FMS sobre PUF es un-sistema para el estudio de la producción de enzimas.
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